AsCas12a蛋白

AsCas12a是一种CRISPR-Cas系统衍生的核酸酶，它具有高特异性和较短的crRNA，适合临床治疗应用。近期研究通过定向进化技术对AsCas12a进行优化，开发出了升级版的AsCas12a Ultra，其在多种细胞中的基因敲除效率接近100%，同时保持了高水平的特异性。

AsCas12a Ultra的基因编辑能力在原代T细胞、造血干/祖细胞、NK细胞以及iPSCs中表现出色，其基因敲除和敲入效率远强于野生型AsCas12a。此外，AsCas12a Ultra在体外生化实验中显示出与野生型AsCas12a相似的编辑特异性，且在人源细胞实验中证实了其高效的编辑活性。

AsCas12a Ultra的发现为基因编辑技术在临床治疗中的应用提供了新的可能性。尤其是在细胞基因组改造领域，如CAR-T和CAR-NK细胞构建中，AsCas12a Ultra的超强效果意味着其在临床应用中具有广阔的前景。

此外，AsCas12a蛋白在靶标搜索过程中表现出与spCas9类似的不对称一维扩散方式，其REC2结构域中富含正电荷的α螺旋通过与双链DNA的非特异性相互作用介导蛋白的一维扩散，同时协助AsCas12a的靶标DNA切割过程，影响基因编辑的特异性。